Приказ Министерства здравоохранения Республики Беларусь от 20.05.2009 N 487 "Об утверждении Инструкции по лабораторной диагностике трихомонадной инфекции"
Архив ноябрь 2011 года
<< Назад |
<<< Навигация Содержание
На основании Положения о Министерстве здравоохранения Республики Беларусь, утвержденного постановлением Совета Министров Республики Беларусь от 23 августа 2000 г. N 1331, в редакции постановления Совета Министров Республики Беларусь от 1 августа 2005 г. N 843, в целях совершенствования организации медицинской помощи населению республики ПРИКАЗЫВАЮ:
1. Утвердить Инструкцию по лабораторной диагностике трихомонадной инфекции (далее - Инструкция).
2. Начальникам управления здравоохранения областных исполнительных комитетов, председателю комитета по здравоохранению Мингорисполкома, руководителям республиканских организаций здравоохранения принять необходимые меры для внедрения Инструкции в практическую работу.
3. Ректорам медицинских университетов, ректору Белорусской медицинской академии последипломного образования внедрить Инструкцию в учебный процесс.
4. Контроль за исполнением приказа возложить на начальника управления организации медицинской помощи Волжанкину Г.В.
Заместитель Министра В.Е.Шевчук
УТВЕРЖДЕНО
Приказ Министерства
здравоохранения
Республики Беларусь
20.05.2009 N 487
ИНСТРУКЦИЯ ПО ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКЕ ТРИХОМОНАДНОЙ ИНФЕКЦИИ
ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ
1. На территории Республики Беларусь лабораторная диагностика трихомонадной инфекции осуществляется в клинико-диагностических, бактериологических и молекулярно-биологических лабораториях.
2. Данная инструкция разработана для решения следующих задач:
- определения показаний к обследованию на трихомонадную инфекцию;
- определения спектра диагностических методов, используемых для диагностики трихомонадной инфекции;
- установления единых требований к порядку диагностики трихомонадной инфекции.
3. Диагноз трихомонадной инфекции устанавливается на основании положительных результатов микроскопического, культурального или молекулярно-биологического исследования при исследовании материалов из мочеполовых путей.
4. Контроль излеченности трихомонадной инфекции проводится тем же методом, с помощью которого устанавливался первичный диагноз: микроскопическим методом - не ранее чем через 10 - 14 дней после окончания лечения, методом амплификации нуклеиновых кислот (МАНК) - не ранее, чем через 4 недели после окончания лечения, культуральным методом - через 10 - 14 дней после окончания лечения.
5. Инструкция включает в себя следующие приложения:
Приложение 1. Показания к обследованию на трихомонадную инфекцию;
Приложение 2. Взятие, транспортировка и хранение клинического материала;
Приложение 3. Микроскопическая диагностика трихомонадной инфекции;
Приложение 4. Культуральная диагностика трихомонадной инфекции;
Приложение 5. Молекулярно-биологическая диагностика трихомонадной инфекции.
Приложение 1
к приказу Министерства
здравоохранения
Республики Беларусь
20.05.2009 N 487
ПЕРЕЧЕНЬ МЕДИЦИНСКИХ ПОКАЗАНИЙ ДЛЯ ОБСЛЕДОВАНИЯ НА ТРИХОМОНАДНУЮ ИНФЕКЦИЮ
-------------------------------------------------+-------------------------
¦ Показания ¦ Рекомендуемый вид ¦
¦ ¦ исследования ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦ ЖЕНЩИНЫ ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦наличие жалоб на выделения из мочеполовых путей,¦микроскопический метод ¦
¦зуд, жжение, дискомфорт в области мочеполовых ¦и / или МАНК ¦
¦органов, боли внизу живота, усиление белей ¦ ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦гиперемия, отечность слизистой оболочки вульвы, ¦микроскопический метод ¦
¦влагалища; ¦и / или МАНК ¦
¦вагинальные выделения серого, серо-желтого, ¦ ¦
¦желто-зеленого цвета, пенистые с неприятным ¦ ¦
¦запахом ¦ ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦эрозивно-язвенные поражения слизистой оболочки ¦микроскопический метод ¦
¦наружных половых органов и (или) кожи внутренней¦и / или МАНК ¦
¦поверхности бедер; ¦ ¦
¦петехиальные кровоизлияния на слизистой ¦ ¦
¦влагалищной части шейки матки ("клубничная шейка¦ ¦
¦матки") ¦ ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦наличие симптомов воспалительных заболеваний ¦микроскопический метод ¦
¦органов малого таза (ВЗОМТ) ¦и / или МАНК ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦бесплодие, невынашивание беременности ¦МАНК или культуральное ¦
¦ ¦исследование ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦направляемые на прерывание беременности, ¦МАНК ¦
¦внутриматочные манипуляции ¦ ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦беременные женщины <*> ¦микроскопический метод ¦
¦ ¦и / или МАНК двухкратно:¦
¦ ¦1-е - при постановке ¦
¦ ¦на учет; ¦
¦ ¦2-е - 36 - 40 недель ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦роженицы без обменных карт в родильных домах ¦микроскопический метод ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦родильницы с осложненным течением послеродового ¦МАНК ¦
¦периода ¦ ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦ МУЖЧИНЫ ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦наличие жалоб на выделения из уретры, зуд, ¦микроскопический метод ¦
¦жжение в области уретры, дизурия ¦или МАНК ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦воспаление в области наружного отверстия уретры,¦микроскопический метод ¦
¦парауретральных ходов ¦или МАНК ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦наличие симптомов восходящей инфекции ¦МАНК или культуральное ¦
¦(простатит, эпидидимит, орхоэпидидимит и др.) ¦исследование ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦эрозивно-язвенные поражения кожи головки ¦микроскопический метод ¦
¦и крайней плоти полового члена ¦или МАНК ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦Бесплодие ¦МАНК или культуральное ¦
¦ ¦исследование ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦ ДЕТИ (ДЕВОЧКИ) ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦Вульвовагинит ¦микроскопический метод ¦
¦ ¦и / или МАНК ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦наличие симптомов ВЗОМТ ¦микроскопический метод ¦
¦ ¦и / или МАНК ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦ ЛИЦА ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦вступавшие в половой контакт с больным ¦микроскопический метод ¦
¦трихомонадной инфекцией ¦или МАНК ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦проходящие скрининговое обследование на другие ¦микроскопический метод ¦
¦ИППП <*> или с установленным диагнозом ИППП ¦или МАНК ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦декретированных профессий при проведении ¦микроскопический метод ¦
¦обязательных медицинских осмотров <*> ¦ ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦подвергшиеся сексуальному насилию ¦МАНК ¦
+------------------------------------------------+------------------------+
¦При проведении репродуктивных технологий ¦МАНК или культуральное ¦
¦(ЭКО, ИКСИ, донорская инсеминация) ¦исследование, при каждом¦
¦ ¦обращении ¦
-------------------------------------------------+-------------------------
--------------------------------
<*> При выявлении признаков воспалительных изменений мочеполового тракта дальнейшее обследование проводится в соответствии с клиническими показаниями.
Приложение 2
к приказу Министерства
здравоохранения
Республики Беларусь
20.05.2009 N 487
ПРАВИЛА ОТБОРА, ТРАНСПОРТИРОВКИ И ХРАНЕНИЯ ПЕРВИЧНЫХ ПРОБ ПРИ ОБСЛЕДОВАНИИ ПАЦИЕНТОВ НА ТРИХОМОНАДНУЮ ИНФЕКЦИЮ
---------------------+------------------+--------------+-------------------+----------------+--------------------
¦ Метод исследования ¦ Материалы ¦ Обследуемый ¦ Правила взятия ¦ Сроки, условия ¦ Примечания ¦
¦ ¦ и оборудование, ¦ очаг / ¦ ¦ хранения и ¦ ¦
¦ ¦ инструментарий ¦ биоматериал ¦ ¦транспортировки ¦ ¦
+--------------------+------------------+--------------+-------------------+----------------+-------------------+
¦Микроскопический: ¦Зонд ¦Отделяемое ¦Подготовка к взятию¦1) при наличии ¦ ¦
¦нативный препарат ¦универсальный; ¦уретры у ¦проб: ¦микроскопа в ¦ ¦
¦ ¦одноразовая ¦мужчин ¦перед взятием ¦кабинете врача ¦ ¦
¦ ¦бактериологическая¦ ¦уретрального ¦проба ¦ ¦
¦ ¦петля (1 мкл, ¦ ¦материала пациент ¦микроскопируется¦ ¦
¦ ¦10 мкл); ¦ ¦массирует уретру ¦немедленно; ¦ ¦
¦ ¦стерильный ватный/¦ ¦от основания пениса¦2) для ¦ ¦
¦ ¦дакроновый ¦ ¦к его головке, ¦транспортировки ¦ ¦
¦ ¦тампон; стерильный¦ ¦область наружного ¦в лабораторию ¦ ¦
¦ ¦марлевый ¦ ¦отверстия уретры ¦приготовленный ¦ ¦
¦ ¦(ватный) тампон; ¦ ¦очистить с помощью ¦препарат ¦ ¦
¦ ¦ложка Фолькмана; ¦ ¦стерильного ¦помещается во ¦ ¦
¦ ¦зеркало ¦ ¦марлевого тампона, ¦влажную камеру, ¦ ¦
¦ ¦вагинальное; ¦ ¦крайнюю плоть ¦в контейнер для ¦ ¦
¦ ¦стекла предметные;¦ ¦отвести назад. ¦транспортировки ¦ ¦
¦ ¦стекла покровные; ¦ ¦Взятие материала: ¦и немедленно ¦ ¦
¦ ¦изотонический ¦ ¦осторожно ввести ¦транспортируется¦ ¦
¦ ¦раствор хлорида ¦ ¦инструмент для ¦в лабораторию ¦ ¦
¦ ¦натрия стерильный;¦ ¦взятия материала в ¦ ¦ ¦
¦ ¦контейнер для ¦ ¦наружное отверстие ¦ ¦ ¦
¦ ¦сбора мочи ¦ ¦мочеиспускательного¦ ¦ ¦
¦ ¦стерильный; ¦ ¦канала (на глубину ¦ ¦ ¦
¦ ¦пробирки с ¦ ¦4 - 6 см) и, слегка¦ ¦ ¦
¦ ¦транспортной ¦ ¦нажимая на переднюю¦ ¦ ¦
¦ ¦средой; ¦ ¦стенку уретры, ¦ ¦ ¦
¦ ¦маркер по стеклу ¦ ¦собрать материал. ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦При наличии ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦свободно стекающих ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦выделений материал ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦получают без ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦предварительного ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦массажа уретры. ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦Отделяемое ¦Подготовка к взятию¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦заднего свода ¦образцов: ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦влагалища ¦стерильным ватным ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦тампоном очистить ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦слизистую наружных ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦половых органов, ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ввести ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦гинекологическое ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦зеркало. ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Взятие материала: ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инструментом для ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦взятия материала ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦собрать отделяемое ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦заднего свода и ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦стенок влагалища ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦(после ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦гистерэктомии ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦материал берется ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦из боковых сводов ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦влагалища). ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦У девочек и женщин,¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦не имевших в ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦анамнезе половых ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦контактов, при ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отсутствии ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦выделений ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инструмент для ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦взятия материала ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦осторожно вводится ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦через гименальное ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отверстие во ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦влагалище и ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦материал берется из¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦заднего свода ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦влагалища. ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦Секрет ¦Сбор материала: ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦предстательной¦- получение ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦железы ¦материала ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦рекомендуется ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦проводить после ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦мочеиспускания; ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦- провести ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ректальный массаж ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦предстательной ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦железы; ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦- материал для ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦исследования ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦собрать из ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦наружного отверстия¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦уретры ¦ ¦ ¦
+--------------------+------------------+--------------+-------------------+----------------+-------------------+
¦Микроскопический: ¦Зонд ¦Отделяемое ¦Подготовка к взятию¦Каждое стекло ¦ ¦
¦окрашенный препарат ¦универсальный; ¦уретры у ¦проб: ¦с образцом ¦ ¦
¦ ¦одноразовая ¦мужчин ¦перед взятием ¦маркируется, ¦ ¦
¦ ¦бактериологическая¦ ¦уретрального ¦высушивается ¦ ¦
¦ ¦петля (1 мкл, ¦ ¦материала пациент ¦и помещается ¦ ¦
¦ ¦10 мкл); ¦ ¦массирует уретру ¦в контейнер для ¦ ¦
¦ ¦стерильный ватный/¦ ¦от основания пениса¦транспортировки ¦ ¦
¦ ¦дакроновый тампон;¦ ¦к его головке, ¦в сопровождении ¦ ¦
¦ ¦стерильный ¦ ¦область наружного ¦направления ¦ ¦
¦ ¦марлевый (ватный) ¦ ¦отверстия уретры ¦(направления и ¦ ¦
¦ ¦тампон; ¦ ¦очистить с помощью ¦стекла ¦ ¦
¦ ¦ложка Фолькмана; ¦ ¦стерильного ¦помещаются ¦ ¦
¦ ¦зеркало ¦ ¦марлевого тампона, ¦отдельно). При ¦ ¦
¦ ¦вагинальное; ¦ ¦крайнюю плоть ¦необходимости ¦ ¦
¦ ¦стекла предметные;¦ ¦отвести назад. ¦хранения ¦ ¦
¦ ¦стекла покровные; ¦ ¦Взятие материала: ¦материала более ¦ ¦
¦ ¦изотонический ¦ ¦осторожно ввести ¦24 часов после ¦ ¦
¦ ¦раствор хлорида ¦ ¦инструмент для ¦высушивания ¦ ¦
¦ ¦натрия стерильный;¦ ¦взятия материала в ¦каждый образец ¦ ¦
¦ ¦контейнер для ¦ ¦наружное отверстие ¦отдельно ¦ ¦
¦ ¦сбора мочи ¦ ¦мочеиспускательного¦фиксируют 96° ¦ ¦
¦ ¦стерильный; ¦ ¦канала (на глубину ¦этиловым спиртом¦ ¦
¦ ¦пробирки с ¦ ¦4 - 6 см) и, слегка¦в течение ¦ ¦
¦ ¦транспортной ¦ ¦нажимая на переднюю¦3 минут. В ¦ ¦
¦ ¦средой; ¦ ¦стенку уретры, ¦направлении ¦ ¦
¦ ¦маркер по стеклу; ¦ ¦собрать материал. ¦должно быть ¦ ¦
¦ ¦спирт этиловый ¦ ¦При наличии ¦указание на ¦ ¦
¦ ¦96° ¦ ¦свободно стекающих ¦проведенную ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦выделений материал ¦фиксацию ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦получают без ¦препарата ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦предварительного ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦массажа уретры. ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦Секрет ¦Сбор материала: ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦предстательной¦- получение ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦железы ¦материала ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦рекомендуется ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦проводить после ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦мочеиспускания; ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦- провести ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ректальный массаж ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦предстательной ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦железы; ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦- материал для ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦исследования ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦собрать из ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦наружного отверстия¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦уретры. ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦Отделяемое ¦Подготовка к взятию¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦влагалища ¦образцов: ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦стерильным ватным ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦тампоном очистить ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦слизистую наружных ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦половых органов, ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ввести ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦гинекологическое ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦зеркало. ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Взятие материала: ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инструментом для ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦взятия материала ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦собрать отделяемое ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦заднего свода и ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦стенок влагалища ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦(после ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦гистерэктомии ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦материал берется ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦из боковых сводов ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦влагалища). ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦У девочек и женщин,¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦не имевших в ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦анамнезе половых ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦контактов, при ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отсутствии ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦выделений ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инструмент для ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦взятия материала ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦осторожно вводится ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦через гименальное ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отверстие во ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦влагалище и ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦материал берется ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦из заднего свода ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦влагалища ¦ ¦ ¦
+--------------------+------------------+--------------+-------------------+----------------+-------------------+
¦Культуральный ¦Зонд ¦Отделяемое ¦Подготовка к взятию¦Материал ¦Материал для ¦
¦(бактериологический)¦универсальный; ¦уретры у ¦проб: ¦поместить в ¦культурального ¦
¦ ¦одноразовая ¦мужчин ¦перед взятием ¦маркированную ¦исследования ¦
¦ ¦бактериологическая¦ ¦уретрального ¦пробирку с ¦берется до начала ¦
¦ ¦петля (1 мкл, ¦ ¦материала пациент ¦транспортной ¦этиологического ¦
¦ ¦10 мкл); ¦ ¦массирует уретру ¦средой или с ¦лечения или не ¦
¦ ¦стерильный ватный/¦ ¦от основания пениса¦жидкой ¦ранее 24 - 48 часов¦
¦ ¦дакроновый тампон;¦ ¦к его головке, ¦питательной ¦после приема ¦
¦ ¦стерильный ¦ ¦область наружного ¦средой (в случае¦антипротозойных ¦
¦ ¦марлевый (ватный) ¦ ¦отверстия уретры ¦возможности ¦препаратов ¦
¦ ¦тампон; ¦ ¦очистить с помощью ¦доставки пробы ¦ ¦
¦ ¦ложка Фолькмана; ¦ ¦стерильного ¦в лабораторию ¦ ¦
¦ ¦зеркало ¦ ¦марлевого тампона, ¦в течение 2 ч), ¦ ¦
¦ ¦вагинальное; ¦ ¦крайнюю плоть ¦направление ¦ ¦
¦ ¦контейнер для ¦ ¦отвести назад. ¦поместить ¦ ¦
¦ ¦сбора мочи ¦ ¦Взятие материала: ¦отдельно, ¦ ¦
¦ ¦стерильный; ¦ ¦осторожно ввести ¦транспортировать¦ ¦
¦ ¦пробирки с ¦ ¦инструмент для ¦в лабораторию ¦ ¦
¦ ¦транспортной ¦ ¦взятия материала в ¦при температуре ¦ ¦
¦ ¦средой; ¦ ¦наружное отверстие ¦25 - 37 °C в ¦ ¦
¦ ¦маркер по стеклу; ¦ ¦мочеиспускательного¦течение 18 - 24 ¦ ¦
¦ ¦питательные среды ¦ ¦канала (на глубину ¦часов ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦4 - 6 см) и, слегка¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦нажимая на переднюю¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦стенку уретры, ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦собрать материал. ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦При наличии ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦свободно стекающих ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦выделений материал ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦получают без ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦предварительного ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦массажа уретры. ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦Исследование ¦Сбор материала: ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦секрета ¦- получение ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦предстательной¦материала ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦железы ¦рекомендуется ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦проводить после ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦мочеиспускания; ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦- провести ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ректальный массаж ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦предстательной ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦железы; ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦- материал для ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦исследования ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦собрать из ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦наружного отверстия¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦уретры. ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦Отделяемое ¦Подготовка к взятию¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦влагалища ¦образцов: ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦стерильным ватным ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦тампоном очистить ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦слизистую наружных ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦половых органов, ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ввести ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦гинекологическое ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦зеркало. ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Взятие материала: ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инструментом для ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦взятия материала ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦собрать отделяемое ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦заднего свода и ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦стенок влагалища ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦(после ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦гистерэктомии ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦материал берется ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦из боковых сводов ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦влагалища). ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦У девочек и женщин,¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦не имевших в ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦анамнезе половых ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦контактов, при ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отсутствии ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦выделений ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инструмент для ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦взятия материала ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦осторожно вводится ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦через гименальное ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отверстие во ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦влагалище и ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦материал берется ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦из заднего свода ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦влагалища ¦ ¦ ¦
+--------------------+------------------+--------------+-------------------+----------------+-------------------+
¦МАНК ¦Зонд универсальный¦Отделяемое ¦Подготовка к взятию¦Материал ¦Описана типовая ¦
¦ ¦для исследования ¦уретры у ¦проб: ¦доставляется в ¦процедура взятия, ¦
¦ ¦на МАНК; ¦мужчин ¦перед взятием ¦предназначенных ¦хранения и ¦
¦ ¦стерильный ¦ ¦уретрального ¦для этого ¦транспортировки ¦
¦ ¦марлевый (ватный) ¦ ¦материала пациент ¦пробирках с ¦материала. В случае¦
¦ ¦тампон; ¦ ¦массирует уретру ¦транспортной ¦расхождения с ¦
¦ ¦стерильный ¦ ¦от основания пениса¦средой согласно ¦требованиями ¦
¦ ¦контейнер для ¦ ¦к его головке, ¦инструкции ¦производителя ¦
¦ ¦мочи; ¦ ¦область наружного ¦производителя ¦тест-систем ¦
¦ ¦вагинальное ¦ ¦отверстия уретры ¦тест-систем. ¦необходимо ¦
¦ ¦зеркало; ¦ ¦очистить с помощью ¦Пробы могут ¦следовать ¦
¦ ¦одноразовые ¦ ¦стерильного ¦храниться при ¦инструкции ¦
¦ ¦пробирки с ¦ ¦марлевого тампона, ¦комнатной ¦производителя. ¦
¦ ¦транспортной ¦ ¦крайнюю плоть ¦температуре ¦Детям ¦
¦ ¦средой ¦ ¦отвести назад. ¦(+18 - 22 °C) в ¦препубертатного ¦
¦ ¦ ¦ ¦Взятие материала: ¦течение 6 часов;¦возраста брать ¦
¦ ¦ ¦ ¦осторожно ввести ¦при +2 - 8 °C - ¦материал из уретры ¦
¦ ¦ ¦ ¦инструмент для ¦в течение ¦не рекомендуется. ¦
¦ ¦ ¦ ¦взятия материала в ¦2 недель; ¦В этом случае ¦
¦ ¦ ¦ ¦наружное отверстие ¦при -20 °C - ¦берутся мазки из ¦
¦ ¦ ¦ ¦мочеиспускательного¦1 месяц, если ¦наружного отверстия¦
¦ ¦ ¦ ¦канала (на глубину ¦иное не ¦мочеиспускательного¦
¦ ¦ ¦ ¦4 - 6 см) и, слегка¦предусмотрено ¦канала или ¦
¦ ¦ ¦ ¦нажимая на переднюю¦производителем ¦собирается моча. ¦
¦ ¦ ¦ ¦стенку уретры, ¦тест-систем. ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦собрать материал. ¦Клинический ¦Допускается ¦
¦ ¦ ¦ ¦При наличии ¦материал, ¦однократное ¦
¦ ¦ ¦ ¦свободно стекающих ¦помещенный ¦размораживание ¦
¦ ¦ ¦ ¦выделений материал ¦в транспортную ¦образца ¦
¦ ¦ ¦ ¦получают без ¦среду, ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦предварительного ¦транспортируется¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦массажа уретры. ¦при температуре ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦+18 - 22 °C в ¦ ¦
¦ ¦ ¦Исследование ¦Сбор материала: ¦течение 2 часов,¦ ¦
¦ ¦ ¦секрета ¦- получение ¦свыше 2 часов - ¦ ¦
¦ ¦ ¦предстательной¦материала ¦при температуре ¦ ¦
¦ ¦ ¦железы ¦рекомендуется ¦+2 - 8 °C (в ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦проводить после ¦термоконтейнере,¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦мочеиспускания; ¦сумке- ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦- провести ¦холодильнике). ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ректальный массаж ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦предстательной ¦Моча должна быть¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦железы; ¦доставлена ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦- материал для ¦в лабораторию ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦исследования ¦в течение ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦собрать из ¦3 часов без ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦наружного отверстия¦дополнительного ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦уретры. ¦замораживания ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦или охлаждения. ¦ ¦
¦ ¦ ¦Отделяемое ¦Подготовка к взятию¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦влагалища ¦образцов: ¦Пробирка с ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦стерильным ватным ¦клиническим ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦тампоном очистить ¦материалом ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦слизистую наружных ¦помещается в ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦половых органов, ¦герметичную ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ввести ¦емкость для ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦гинекологическое ¦транспортировки ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦зеркало. ¦в сопровождении ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦Взятие материала: ¦соответствующего¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инструментом для ¦направления ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦взятия материала ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦собрать отделяемое ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦заднего свода и ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦стенок влагалища ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦(после ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦гистерэктомии ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦материал берется ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦из боковых сводов ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦влагалища). ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦У девочек и женщин,¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦не имевших в ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦анамнезе половых ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦контактов с ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦пенетрацией, при ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отсутствии ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦выделений ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦инструмент для ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦взятия материала ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦осторожно вводится ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦через гименальное ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦отверстие во ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦влагалище и ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦материал берется ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦из заднего свода ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦влагалища ¦ ¦ ¦
¦ ¦ +--------------+-------------------+ ¦ ¦
¦ ¦ ¦Моча ¦Исследуется первая ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦порция свободно ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦выпущенной мочи ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦после задержки ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦мочеиспускания ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦не менее 3 часов в ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦объеме 10 - 20 мл, ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦которая отбирается ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦в стерильный ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦маркированный ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦контейнер ¦ ¦ ¦
---------------------+------------------+--------------+-------------------+----------------+--------------------
Приложение 3
к приказу Министерства
здравоохранения
Республики Беларусь
20.05.2009 N 487
МЕТОДИКА МИКРОСКОПИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ТРИХОМОНАДНОЙ ИНФЕКЦИИ
1. Микроскопическое исследование нативного препарата
-----------------+---------------------------------------------------------
¦Название ¦Микроскопическое исследование нативного препарата ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Принцип ¦Выявление воспалительных изменений в первичных образцах,¦
¦ ¦поиск и обнаружение Trichomonas vaginalis ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Материал для ¦отделяемое из уретры; ¦
¦исследования ¦отделяемое заднего свода влагалища ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Необходимое ¦1) бинокулярный микроскоп с возможностью увеличения ¦
¦оборудование ¦до x1000 с обычным или темнопольным конденсором; ¦
¦и материалы ¦2) пипетки пластиковые или дозатор полуавтоматический ¦
¦ ¦с наконечниками; ¦
¦ ¦3) перчатки медицинские; ¦
¦ ¦4) емкости для сбора и обработки стекол; ¦
¦ ¦5) предметные стекла; ¦
¦ ¦6) покровные стекла; ¦
¦ ¦7) маркер ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Реагенты ¦- изотонический раствор хлорида натрия стерильный; ¦
¦ ¦- антисептические и дезинфицирующие средства, ¦
¦ ¦разрешенные к применению ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Подготовка ¦Приготовление препарата: ¦
¦к проведению ¦- на предметное стекло поместить каплю теплого (+18 - ¦
¦анализа ¦22 °C) изотонического раствора хлорида натрия ¦
¦ ¦стерильного; ¦
¦ ¦- поместить инструмент с исследуемым материалом на ¦
¦ ¦поверхность капли и перемешать содержимое; ¦
¦ ¦- взвесь накрыть покровным стеклом и микроскопировать ¦
¦ ¦при увеличении x100, x400 с опущенным конденсором или ¦
¦ ¦в темном поле зрения ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Учет и оценка ¦При увеличении микроскопа x100 оценивают: ¦
¦результатов ¦- наличие и состояние клеток вагинального эпителия ¦
¦ ¦(эпителия уретры); ¦
¦ ¦- количество и морфологию лейкоцитов; ¦
¦ ¦- наличие и морфологию микрофлоры; ¦
¦ ¦- наличие Trichomonas vaginalis. ¦
¦ ¦При увеличении микроскопа x400 оценивают морфологию ¦
¦ ¦и движение Trichomonas vaginalis: ¦
¦ ¦размер Trichomonas vaginalis приблизительно равен ¦
¦ ¦размеру ядра эпителиальной клетки или сегментоядерного ¦
¦ ¦нейтрофила; форма грушевидная, овальная, реже - ¦
¦ ¦округлая, движения - толчкообразные, поступательные и ¦
¦ ¦вращательные за счет жгутиков и ундулирующей мембраны. ¦
¦ ¦Необходимо дифференцировать движение Trichomonas ¦
¦ ¦vaginalis от пассивного (броуновского) движения клеток ¦
¦ ¦во влажной среде. ¦
¦ ¦Критерием для лабораторного заключения о наличии ¦
¦ ¦Trichomonas vaginalis является обнаружение хотя бы ¦
¦ ¦одного организма с четко различимыми жгутиками. ¦
¦ ¦Trichomonas vaginalis может быть обнаружена при ¦
¦ ¦общеклиническом исследовании осадка мочи ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Заключение ¦1) подвижные организмы, сходные с Trichomonas vaginalis,¦
¦лабораторного ¦обнаружены; ¦
¦исследования ¦2) подвижные организмы, сходные с Trichomonas vaginalis,¦
¦ ¦не обнаружены ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Контроль ¦На преаналитическом этапе оценивается: ¦
¦качества ¦- взятие биологического материала в соответствии с ¦
¦ ¦требованиями, наличие материала в препарате, наличие ¦
¦ ¦в исследуемом материале клеток многослойного плоского ¦
¦ ¦эпителия; ¦
¦ ¦- выполнение требований хранения и доставки материала ¦
¦ ¦в лабораторию; наличие в препарате кристаллов ¦
¦ ¦свидетельствует о его подсыхании; ¦
¦ ¦- выполнение требований маркировки проб и соответствия ¦
¦ ¦маркировки пробы маркировке направления. ¦
¦ ¦Мероприятия аналитического этапа: ¦
¦ ¦- соблюдение технологии приготовления нативного ¦
¦ ¦препарата; ¦
¦ ¦- учет результатов с контрольным материалом в ¦
¦ ¦соответствии с официально признанными критериями. ¦
¦ ¦Мероприятия постаналитического этапа: ¦
¦ ¦- проверка правильности внесения результатов в бланк ¦
¦ ¦исследования; ¦
¦ ¦- своевременное доведение информации до врача, ¦
¦ ¦назначившего исследование ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Источники ошибок¦- нарушение техники взятия клинического материала; ¦
¦ ¦- использование холодного физиологического раствора; ¦
¦ ¦- нарушение условий транспортировки клинического ¦
¦ ¦материала в лабораторию (неоптимальная температура ¦
¦ ¦и высыхание образца); ¦
¦ ¦- неудовлетворительное техническое состояние микроскопа;¦
¦ ¦- нарушение методики проведения микроскопического ¦
¦ ¦анализа; ¦
¦ ¦- недостаточная квалификация персонала ¦
-----------------+---------------------------------------------------------
2. Микроскопическое исследование окрашенного препарата
-----------------+---------------------------------------------------------
¦ Название ¦ Микроскопическое исследование окрашенного препарата ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Принцип ¦Выявление воспалительных изменений в пробах, поиск ¦
¦ ¦и обнаружение Trichomonas vaginalis ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Материал для ¦отделяемое из уретры; ¦
¦исследования ¦отделяемое заднего свода влагалища ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Необходимое ¦1) бинокулярный микроскоп с возможностью увеличения ¦
¦оборудование ¦до x1000; ¦
¦и материалы ¦2) пипетки пластиковые; ¦
¦ ¦3) песочные часы на 1 и 3 минуты или таймер; ¦
¦ ¦4) приспособление для окраски мазков; ¦
¦ ¦5) перчатки медицинские; ¦
¦ ¦6) емкости для сбора и обработки стекол; ¦
¦ ¦7) предметные стекла; ¦
¦ ¦8) стеклянный стакан; ¦
¦ ¦9) фильтровальная бумага; ¦
¦ ¦10) маркер ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Реагенты ¦1) иммерсионное масло; ¦
¦ ¦2) 1% водный раствор метиленового синего; ¦
¦ ¦3) 1% спиртовой раствор метиленового синего ¦
¦ ¦(по Леффлеру); ¦
¦ ¦4) спирт этиловый 96°; ¦
¦ ¦5) антисептические и дезинфицирующие растворы ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Подготовка ¦Перед окрашиванием препараты фиксировать 96° этиловым ¦
¦к проведению ¦спиртом (погружением на 1 - 2 мин), при окраске ¦
¦анализа ¦по Леффлеру предварительная фиксация не требуется. ¦
¦ ¦Зафиксированные препараты можно хранить при комнатной ¦
¦ ¦температуре в течение нескольких дней. ¦
¦ ¦Приготовление растворов красителей: ¦
¦ ¦- 1% водный раствор метиленового синего: растворить 1 г ¦
¦ ¦метиленового синего в 100 мл дистиллированной воды, ¦
¦ ¦фильтровать через бумажный фильтр; ¦
¦ ¦- метиленовый синий (по Леффлеру) 1% спиртовой раствор ¦
¦ ¦метиленового синего: растворить 1 г метиленового синего ¦
¦ ¦в 100 мл 96° этилового спирта ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Проведение ¦Окраска мазков водным раствором метиленового синего: ¦
¦анализа ¦на фиксированный препарат нанести 1% водный раствор ¦
¦ ¦метиленового синего на 1 - 2 мин (в зависимости от ¦
¦ ¦толщины мазка). Тщательно смыть оставшийся краситель ¦
¦ ¦струей холодной воды. Препарат высушить на воздухе. ¦
¦ ¦Окраска мазков спиртовым раствором метиленового синего ¦
¦ ¦по Леффлеру: ¦
¦ ¦высушенный препарат опустить в стакан с 1% метиленовым ¦
¦ ¦синим по Леффлеру на 10 - 15 сек, промыть погружением ¦
¦ ¦в другой стакан с водопроводной водой, препарат высушить¦
¦ ¦на воздухе ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Учет и оценка ¦Оценка мазков, окрашенных водным и спиртовым растворами ¦
¦результатов ¦метиленового синего: ¦
¦ ¦- при микроскопии препарата видны: ядра клеток, ¦
¦ ¦окрашенные в синий цвет; цитоплазма, окрашенная в ¦
¦ ¦голубой цвет разной интенсивности; бактериальная ¦
¦ ¦микрофлора, окрашенная в синий цвет разной ¦
¦ ¦интенсивности; ¦
¦ ¦- Trichomonas vaginalis в препарате, окрашенном ¦
¦ ¦метиленовым синим, имеет различную форму - грушевидную, ¦
¦ ¦овальную или округлую, контуры клетки хорошо выражены, ¦
¦ ¦ядро, как правило, расположено эксцентрично, овальное ¦
¦ ¦или вытянутое, имеет вид "сливовой косточки", окрашено ¦
¦ ¦интенсивнее, чем "пенистая" цитоплазма ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Заключение ¦- организмы, сходные с Trichomonas vaginalis, ¦
¦лабораторного ¦обнаружены; ¦
¦исследования ¦- организмы, сходные с Trichomonas vaginalis, не ¦
¦ ¦обнаружены ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Контроль ¦На преаналитическом этапе оценивается: ¦
¦качества ¦- взятие биологического материала в соответствии с ¦
¦ ¦требованиями; ¦
¦ ¦- выполнение требований хранения и доставки материала ¦
¦ ¦в лабораторию; ¦
¦ ¦- выполнение требований маркировки проб и соответствия ¦
¦ ¦маркировки пробы маркировке направления; ¦
¦ ¦- контроль растворов красителей (внешнее состояние, срок¦
¦ ¦годности), условия и сроки хранения; ¦
¦ ¦- качество лабораторной посуды. ¦
¦ ¦Мероприятия аналитического этапа: ¦
¦ ¦- соблюдение технологии окраски препарата. Проведение ¦
¦ ¦визуального анализа качества окрашивания препарата по ¦
¦ ¦Граму включает оценку интенсивности окрашивания клеток, ¦
¦ ¦при этом ядра эпителиальных клеток и лейкоцитов окрашены¦
¦ ¦в фиолетовый цвет, а цитоплазма - в розовый цвет. Каждая¦
¦ ¦новая серия реактивов для окрашивания по Граму должна ¦
¦ ¦быть проверена на качество при помощи грамположительных ¦
¦ ¦и грамотрицательных штаммов бактерий; ¦
¦ ¦- учет результатов в соответствии с официально ¦
¦ ¦признанными критериями. ¦
¦ ¦Мероприятия постаналитического этапа: ¦
¦ ¦- проверка правильности внесения результатов в бланк ¦
¦ ¦исследования; ¦
¦ ¦- своевременное доведение информации до врача, ¦
¦ ¦назначившего исследование ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Источники ошибок¦- неудовлетворительное техническое состояние микроскопа;¦
¦ ¦- нарушение правил получения биологического материала ¦
¦ ¦для исследования; ¦
¦ ¦- использование загрязненной лабораторной посуды, ¦
¦ ¦старых, поцарапанных стекол; ¦
¦ ¦- нарушение методики приготовления препарата - слишком ¦
¦ ¦толстый препарат; ¦
¦ ¦- нарушение методики окраски препаратов; ¦
¦ ¦- нарушение методики проведения микроскопического ¦
¦ ¦анализа ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Устранение ¦- поддержание микроскопа в надлежащем техническом ¦
¦ошибок ¦состоянии; ¦
¦ ¦- следование данной инструкции; ¦
¦ ¦- при неправильной окраске надо повторить взятие ¦
¦ ¦материала и окраску мазка ¦
-----------------+---------------------------------------------------------
Приложение 4
к приказу Министерства
здравоохранения
Республики Беларусь
20.05.2009 N 487
МЕТОДИКА КУЛЬТУРАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ТРИХОМОНАДНОЙ ИНФЕКЦИИ
-----------------+---------------------------------------------------------
¦Название ¦Культуральный (бактериологический) метод диагностики ¦
¦ ¦трихомонадной инфекции ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Принцип ¦Выделение культуры Trichomonas vaginalis с ¦
¦ ¦использованием специальных питательных сред с ¦
¦ ¦последующей идентификацией по морфологическим признакам ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Биологический ¦отделяемое из уретры; ¦
¦материал для ¦отделяемое заднего свода влагалища; ¦
¦исследования ¦центрифугат первой порции мочи ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Подготовка проб ¦Дополнительная подготовка проб, полученных из уретры, ¦
¦к исследованию ¦цервикального канала, влагалища, не проводится. ¦
¦ ¦Первичную пробу первой порции мочи центрифугировать при ¦
¦ ¦скорости вращения ротора 1000 - 1500 оборотов в минуту ¦
¦ ¦в течение 10 минут. Надосадочную жидкость удалить, ¦
¦ ¦осадок центрифугата подлежит дальнейшему исследованию ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Оборудование, ¦1) термостат на 36 +/- 1 °C; ¦
¦инструменты ¦2) анаэростат или пакеты для создания анаэробных ¦
¦и материалы ¦условий культивирования; ¦
¦ ¦3) бактериологический анализатор; ¦
¦ ¦4) спиртовка или газовая горелка; ¦
¦ ¦5) световой микроскоп; ¦
¦ ¦6) средства индивидуальной защиты персонала; ¦
¦ ¦7) предметные стекла; ¦
¦ ¦8) покровные стекла; ¦
¦ ¦9) бактериологические петли; ¦
¦ ¦10) пробирки или флаконы для среды; ¦
¦ ¦11) маркер; ¦
¦ ¦12) емкость для сбора отходов ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Реагенты ¦Транспортные и питательные среды или коммерческие наборы¦
¦ ¦для выделения и идентификации Trichomonas vaginalis, ¦
¦ ¦зарегистрированные в установленном порядке на территории¦
¦ ¦страны. ¦
¦ ¦Вазелиновое масло. ¦
¦ ¦Красители для микроскопического исследования окрашенных ¦
¦ ¦препаратов (1% водный или спиртовый раствор метиленового¦
¦ ¦синего) ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Подготовка ¦Культивирование Trichomonas vaginalis следует проводить ¦
¦к проведению ¦во флаконах или пробирках с количеством среды не менее ¦
¦анализа ¦5 мл. Возможно использование коммерческих тест-систем, ¦
¦ ¦не требующих специальной подготовки. Хранение и ¦
¦ ¦приготовление сред осуществляют в соответствии с ¦
¦ ¦инструкцией производителя ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Процедура ¦Пробу биологического материала засевают с помощью ¦
¦анализа ¦бактериологической петли в питательную среду. При ¦
¦ ¦использовании транспортных сред посев проводится ¦
¦ ¦тампоном, извлеченным из флакона (пробирки) с ¦
¦ ¦транспортной средой. Поверхность среды заливают ¦
¦ ¦стерильным вазелиновым маслом или используют другой ¦
¦ ¦способ для создания анаэробных условий (анаэростат, ¦
¦ ¦тест-пакеты и др.). ¦
¦ ¦Пробирки с посевами инкубируют при +37 °C. Просмотр ¦
¦ ¦посевов производят через 24 часа и далее ежедневно. ¦
¦ ¦При использовании коммерческих культуральных систем ¦
¦ ¦руководствуются инструкцией производителя ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Учет и оценка ¦Оценка вида колоний. Trichomonas vaginalis при ¦
¦результатов ¦культивировании в жидкой питательной среде дает ¦
¦ ¦придонный рост в виде плотного или рыхлого беловатого ¦
¦ ¦осадка, напоминающего "облачко". ¦
¦ ¦При отсутствии роста посевы инкубируют до 7 суток, ¦
¦ ¦прежде чем окончательно выдать отрицательный результат. ¦
¦ ¦В случае сильного загрязнения посева может потребоваться¦
¦ ¦повторный пассаж (пересев) на питательную среду для ¦
¦ ¦снижения контаминации. ¦
¦ ¦После каждого просмотра культуры необходимо производить ¦
¦ ¦ее микроскопическое исследование. Приготовление мазка из¦
¦ ¦культуры и его исследование и учет результатов ¦
¦ ¦производится в соответствии с требованиями данной ¦
¦ ¦Инструкции по микроскопическому исследованию. ¦
¦ ¦Форма лабораторного заключения культурального ¦
¦ ¦(бактериологического) исследования: ¦
¦ ¦- Trichomonas vaginalis выделена; ¦
¦ ¦- Trichomonas vaginalis не выделена ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Контроль ¦На преаналитическом этапе оценивается: ¦
¦качества ¦- взятие биологического материала в соответствии ¦
¦ ¦с требованиями; ¦
¦ ¦- выполнение требований хранения и доставки материала ¦
¦ ¦в лабораторию; ¦
¦ ¦- выполнение требований маркировки проб и соответствия ¦
¦ ¦маркировки пробы маркировке направления; ¦
¦ ¦- контроль качества транспортных и питательных сред ¦
¦ ¦(стерильность, ростовые свойства, способность подавлять ¦
¦ ¦рост контаминирующей флоры, сроки и условия хранения); ¦
¦ ¦- проверка среды на стерильность осуществляется путем ¦
¦ ¦инкубации образца среды в термостате при +37 °C в ¦
¦ ¦течение 48 часов; ¦
¦ ¦- контроль ростовых свойств проводится путем посева ¦
¦ ¦референс-штамма Trichomonas vaginalis; ¦
¦ ¦- контроль среды на способность подавлять рост ¦
¦ ¦контаминирующей флоры проводится путем посева референс- ¦
¦ ¦штаммов E. coli, St. epidermidis, N. sicca, C. аlbicans;¦
¦ ¦- контроль качества реагентов (внешнее состояние, срок ¦
¦ ¦годности), условия и сроки хранения; ¦
¦ ¦- качество лабораторной посуды; ¦
¦ ¦- своевременность проведения метрологической поверки ¦
¦ ¦средств измерения, используемых в лаборатории. ¦
¦ ¦Мероприятия аналитического этапа: ¦
¦ ¦- выполнение методики в соответствии с настоящей ¦
¦ ¦Инструкцией или инструкцией производителя тест-систем; ¦
¦ ¦- соблюдение технологии окраски в соответствии с ¦
¦ ¦Инструкцией; ¦
¦ ¦- учет результатов в соответствии с официально ¦
¦ ¦признанными критериями. ¦
¦ ¦Мероприятия постаналитического этапа: ¦
¦ ¦- проверка правильности внесения результатов в бланк ¦
¦ ¦исследования; ¦
¦ ¦- своевременное доведение информации до врача, ¦
¦ ¦назначившего исследование ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Источники ошибок¦Нарушение сроков и температурного режима при доставке ¦
¦и пути их ¦материала. ¦
¦устранения ¦Использование некачественных сред и реактивов. ¦
¦ ¦Неудовлетворительное состояние оборудования. ¦
¦ ¦Средства измерения, используемые для проведения ¦
¦ ¦исследования, должны иметь сертификат о государственной ¦
¦ ¦поверке. ¦
¦ ¦Нарушение методики посева и кратности просмотра. ¦
¦ ¦Проведение исследования должно выполняться в ¦
¦ ¦соответствии с требованиями настоящей инструкции ¦
¦ ¦и производителя тест-систем ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Противопоказания¦Данный метод для широкого использования не ¦
¦для применения ¦рекомендуется, предлагается для использования в научных ¦
¦метода ¦целях и судебной практике ¦
-----------------+---------------------------------------------------------
Приложение 5
к приказу Министерства
здравоохранения
Республики Беларусь
20.05.2009 N 487
МЕТОДИКА МОЛЕКУЛЯРНО-БИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ТРИХОМОНАДНОЙ ИНФЕКЦИИ
-----------------+---------------------------------------------------------
¦Название ¦Молекулярно-биологический метод диагностики хламидийной ¦
¦ ¦инфекции (ПЦР) ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Принцип ¦Диагностика Trichomonas vaginalis посредством ¦
¦ ¦обнаружения в образцах первичных проб нуклеиновых кислот¦
¦ ¦возбудителя. ¦
¦ ¦Основные принципы организации ПЦР-лабораторий и ¦
¦ ¦проведения молекулярно-биологического метода диагностики¦
¦ ¦изложены в инструкции МЗ РБ "Организация работ в ¦
¦ ¦лабораториях, использующих метод полимеразной цепной ¦
¦ ¦реакции (ПЦР)" рег. N 090-1008 от 13.11.2008 ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Биологический ¦- соскоб эпителиальных клеток из уретры; ¦
¦материал для ¦- отделяемое из заднего свода влагалища; ¦
¦исследования ¦- моча ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Подготовка проб ¦В случае хранения проб в морозильной камере пробирки ¦
¦к исследованию ¦с образцами первичных проб следует выдержать при ¦
¦ ¦комнатной температуре до их полного оттаивания. ¦
¦ ¦Не допускается повторное замораживание-оттаивание проб ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Оборудование, ¦1) ПЦР-боксы для проведения ПЦР-исследований (не менее ¦
¦инструменты ¦2 шт.); ¦
¦и материалы ¦2) холодильники на 2 - 8 °C с морозильной камерой ¦
¦ ¦(не менее 3 шт.); ¦
¦ ¦3) твердотельные термостаты для микропробирок ¦
¦ ¦(не менее 2 шт.); ¦
¦ ¦4) высокоскоростная (до 14000 об/мин) микроцентрифуга ¦
¦ ¦для пробирок типа "Eppendorf"; ¦
¦ ¦5) микроцентрифуги-вортексы для микропробирок ¦
¦ ¦(не менее 3 шт.); ¦
¦ ¦6) амплификатор (термоциклер) или амплификатор с ¦
¦ ¦детекцией результатов амплификации в режиме реального ¦
¦ ¦времени; ¦
¦ ¦7) ПЦР-детектор флуоресценции; ¦
¦ ¦8) источник постоянного тока для электрофореза; ¦
¦ ¦9) камера для горизонтального электрофореза с плашками ¦
¦ ¦и гребенками для приготовления геля; ¦
¦ ¦10) трансиллюминатор для детекции продуктов ¦
¦ ¦амплификации в агарозном геле; ¦
¦ ¦11) видеосистема для регистрации изображений; ¦
¦ ¦12) компьютер; ¦
¦ ¦13) микроволновая печь для приготовления агарозного ¦
¦ ¦геля или магнитная плитка-мешалка; ¦
¦ ¦14) одноразовые пластиковые микропробирки типа ¦
¦ ¦"Eppendorf" 1,5 мл; ¦
¦ ¦15) одноразовые пластиковые микропробирки 0,5 или ¦
¦ ¦0,2 мл; ¦
¦ ¦16) наборы автоматических дозаторов переменного объема ¦
¦ ¦(отдельно для этапа выделения, амплификации выделенной ¦
¦ ¦нуклеиновой кислоты и детекции продуктов амплификации ¦
¦ ¦методом гель-электрофореза); ¦
¦ ¦17) одноразовые наконечники для дозаторов переменного ¦
¦ ¦объема, тестированные на отсутствие ДНК/РНК; ¦
¦ ¦18) одноразовые наконечники с аэрозольным барьером ¦
¦ ¦для дозаторов переменного объема, тестированные на ¦
¦ ¦отсутствие ДНК/РНК; ¦
¦ ¦19) стеклянные стаканы; ¦
¦ ¦20) стеклянные колбы; ¦
¦ ¦21) цилиндры; ¦
¦ ¦22) стеклянные палочки; ¦
¦ ¦23) штативы для микропробирок; ¦
¦ ¦24) штативы для автоматических дозаторов; ¦
¦ ¦25) емкости для дезинфекции; ¦
¦ ¦26) дезинфицирующие средства; ¦
¦ ¦27) бактерицидные облучатели; ¦
¦ ¦28) контейнеры для транспортировки образцов первичных ¦
¦ ¦проб; ¦
¦ ¦29) средства индивидуальной защиты ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Реагенты ¦- набор реагентов, зарегистрированных в МЗ РБ, для ¦
¦ ¦выделения нуклеиновых кислот из проб первичных образцов;¦
¦ ¦- набор реагентов, зарегистрированных в МЗ РБ, для ¦
¦ ¦проведения амплификации нуклеиновых кислот с детекцией ¦
¦ ¦методом гель-электрофореза; ¦
¦ ¦- набор реагентов, зарегистрированных в МЗ РБ, для ¦
¦ ¦проведения амплификации нуклеиновых кислот с детекцией ¦
¦ ¦продуктов амплификации в режиме реального времени; ¦
¦ ¦- набор реагентов, зарегистрированных в МЗ РБ, для ¦
¦ ¦детекции продуктов амплификации методом ¦
¦ ¦гель-электрофореза; ¦
¦ ¦- дистиллированная вода; ¦
¦ ¦- 70% этиловый спирт ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Подготовка ¦Все работы проводятся с использованием одноразовых ¦
¦к проведению ¦расходных материалов, спецодежда меняется при переходе ¦
¦анализа ¦из одного помещения (зоны) в другое ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Процедура ¦Процедура включает в себя следующие этапы: ¦
¦анализа ¦- пробоподготовка (выделение нуклеиновых кислот и ¦
¦ ¦удаление ингибиторов ПЦР) из образцов первичных проб ¦
¦ ¦или чистой культуры микроорганизма; ¦
¦ ¦- проведение амплификации; ¦
¦ ¦- детекция и учет продуктов амплификации. ¦
¦ ¦Технология проведения этапов анализа описана ¦
¦ ¦в соответствующих инструкциях и рекомендациях ¦
¦ ¦производителей тест-систем. ¦
¦ ¦Организацию работ на всех этапах, а также ¦
¦ ¦обеззараживание проб необходимо проводить в соответствии¦
¦ ¦с инструкцией МЗ РБ "Организация работ в лабораториях, ¦
¦ ¦использующих метод полимеразной цепной реакции (ПЦР)" ¦
¦ ¦рег. N 090-1008 от 13.11.2008 ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Учет и оценка ¦Результаты амплификации анализируют с помощью: ¦
¦результатов ¦гель-электрофореза, флуоресцентного ПЦР-детектора или ¦
¦ ¦с использованием амплификатора с детекцией продуктов ¦
¦ ¦амплификации в режиме реального времени. ¦
¦ ¦Проведение учета и оценки полученных результатов ¦
¦ ¦осуществляется согласно инструкциям производителей ¦
¦ ¦тест-систем ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Заключение ¦Нуклеиновая кислота, специфичная для Trichomonas ¦
¦лабораторного ¦vaginalis, обнаружена. ¦
¦исследования ¦Нуклеиновая кислота, специфичная для Trichomonas ¦
¦ ¦vaginalis, не обнаружена ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Контроль ¦На преаналитическом этапе оценивается: ¦
¦качества ¦- взятие биологического материала в соответствии ¦
¦ ¦с требованиями; ¦
¦ ¦- выполнение требований хранения и доставки материала ¦
¦ ¦в лабораторию; ¦
¦ ¦- выполнение требований маркировки проб и соответствия ¦
¦ ¦маркировки пробы маркировке направления; ¦
¦ ¦- контроль реагентов (внешнее состояние, срок годности),¦
¦ ¦условия и сроки хранения; ¦
¦ ¦- качество лабораторной посуды. ¦
¦ ¦Мероприятия аналитического этапа: ¦
¦ ¦- включение официально зарегистрированных контрольных ¦
¦ ¦материалов; ¦
¦ ¦- соблюдение технологии выполнения процедуры в ¦
¦ ¦соответствии с инструкцией производителя тест-систем; ¦
¦ ¦- учет результатов с контрольным материалом и испытуемым¦
¦ ¦образцом в соответствии с официально признанными ¦
¦ ¦критериями. ¦
¦ ¦Внутренний контрольный образец, добавляемый на стадии ¦
¦ ¦выделения нуклеиновой кислоты, позволяет судить ¦
¦ ¦о наличии в пробах веществ, ингибирующих ПЦР, а также ¦
¦ ¦о качестве пробоподготовки. ¦
¦ ¦Технология проведения реакции амплификации подразумевает¦
¦ ¦обязательную постановку наряду с опытными пробами ¦
¦ ¦положительных и отрицательных контрольных образцов. ¦
¦ ¦Положительный контроль этапа амплификации включает ¦
¦ ¦в себя все компоненты реакции, но вместо материала ¦
¦ ¦клинического образца, прошедшего пробоподготовку, ¦
¦ ¦вносится контрольный препарат нуклеиновой кислоты. ¦
¦ ¦Отрицательный контроль включает в себя все компоненты ¦
¦ ¦реакции, но вместо материала клинического образца, ¦
¦ ¦прошедшего пробоподготовку, вносится буфер или ¦
¦ ¦деионизованная вода. Отрицательный контроль необходим ¦
¦ ¦для проверки компонентов реакции на отсутствие в них ¦
¦ ¦специфической нуклеиновой кислоты или клеток возбудителя¦
¦ ¦вследствие контаминации и для исключения получения ¦
¦ ¦ложноположительных результатов. ¦
¦ ¦Внутрилабораторный контроль качества проводят не реже ¦
¦ ¦1 раза в месяц путем исследования шифрованных ¦
¦ ¦контрольных панелей, содержащих "положительные" ¦
¦ ¦и "отрицательные" пробы. Контрольные панели могут быть ¦
¦ ¦приготовлены в лаборатории или использованы ¦
¦ ¦референс-панели, зарегистрированные в МЗ РБ. ¦
¦ ¦В рамках внутрилабораторного контроля качества 1 раз в ¦
¦ ¦месяц, а также при подозрении и для выявления возможной ¦
¦ ¦контаминации лаборатории нуклеиновыми кислотами следует ¦
¦ ¦проводить исследования смывов с рабочих поверхностей ¦
¦ ¦и оборудования. ¦
¦ ¦Для обеспечения внешнего контроля качества проводимых ¦
¦ ¦исследований используются референс-панели, разрешенные ¦
¦ ¦к применению на территории РБ. ¦
¦ ¦Мероприятия постаналитического этапа: ¦
¦ ¦- проверка правильности внесения результатов в бланк ¦
¦ ¦исследования и формулировка лабораторного заключения; ¦
¦ ¦- своевременное доведение информации до врача, ¦
¦ ¦назначившего исследование ¦
+----------------+--------------------------------------------------------+
¦Перечень ¦Появление специфической полосы в отрицательном контроле ¦
¦возможных ошибок¦свидетельствует о наличии контаминации реактивов или ¦
¦при выполнении ¦проб. В этом случае результаты анализа по всем пробам ¦
¦и пути их ¦считаются недействительными. Контаминация может быть ¦
¦устранения ¦спорадическая (появление ложноположительных результатов ¦
¦ ¦в некоторых пробах) и тотальная (появление ¦
¦ ¦ложноположительных результатов в каждой пробе). ¦
¦ ¦Требуется повторить анализ проб, а также предпринять ¦
¦ ¦меры по выявлению источника контаминации. ¦
¦ ¦Появление неспецифических продуктов амплификации при их ¦
¦ ¦детекции методом электрофореза: дополнительные полосы, ¦
¦ ¦"шмеры". Появление в дорожках неспецифических полос на ¦
¦ ¦разных уровнях свидетельствует о неверном температурном ¦
¦ ¦режиме в ячейках амплификатора или об отсутствии ¦
¦ ¦"горячего старта". При этом необходимо отрегулировать ¦
¦ ¦температурный режим в ячейках амплификатора ¦
¦ ¦и использовать "горячий старт" до начала циклов ¦
¦ ¦амплификации. ¦
¦ ¦Отсутствие в пробе полос внутреннего контроля ¦
¦ ¦и специфического фрагмента амплификации ДНК ¦
¦ ¦свидетельствует об ошибке в процедуре подготовки ¦
¦ ¦клинического материала, а результаты, полученные по ¦
¦ ¦данной пробе, считаются недействительными. Требуется ¦
¦ ¦повторить анализ пробы, начиная с этапа выделения. ¦
¦ ¦При проведении детекции в режиме реального времени ¦
¦ ¦значение порового цикла в пробе выше параметра, ¦
¦ ¦указанного производителем тест-системы. Следует ¦
¦ ¦повторить анализ пробы, начиная с этапа пробоподготовки ¦
-----------------+---------------------------------------------------------
Указы России 2009 карта новых документов |
